„Както всички знаем, PCR е основен експериментален метод в биохимичните лаборатории. Експерименталните резултати винаги са незадоволителни, което може да се дължи на леко замърсяване на PCR пластмасови консумативи или експериментална интерференция, причинена от въвеждането на инхибитори. Има и друга много важна причина: неправилният избор на консумативи също ще окаже голямо влияние върху експерименталните резултати.
Има много причини, които влияят върху резултатите от PCR експериментите: обикновено има следните 7 вида.
1. Праймери: Праймерите са ключът към специфичната реакция на PCR, а специфичността на PCR продуктите зависи от степента на комплементарност между праймерите и матричната ДНК;
2. Ензим и неговата концентрация;
3. Качеството и концентрацията на dNTP;
4. Матрична (целеви ген) нуклеинова киселина;
5. Концентрация на Mg2+;
6. Настройка на температура и време;
7. Брой цикли;
8. Оборудване, консумативи и др.
Сред многото влияещи фактори, консумативите са един от много важните и лесно пренебрегвани фактори.
Има много видове
PCR консумативи: 8 епруветки, епруветки с нисък обем, стандартни епруветки, без игла, с полу игла, с пълна игла и серия от PCR и qPCR плаки. Много е трудно да се избере и има много общи проблеми, нека да разгледаме проблемите, които всеки избира
PCR консумативи, и как да ги решим?
Защо са
PCR консумативиобикновено направени от PP?
Отговор: Консумативите за PCR/qPCR обикновено са изработени от полипропилен (PP), тъй като той е биологично инертен материал, повърхността не е лесна за прилепване към биомолекули и има добра химическа устойчивост и температурна поносимост (може да се автоклавира при 121 градуса) бактерии и също така може да издържи температурни промени по време на топлинен цикъл). Тези материали обикновено са в пряк контакт с реактиви или проби, така че по време на производствения и подготвителния процес трябва да бъдат избрани висококачествени материали и добри техники за обработка.