> Блог > Новини от индустрията

Какви са функциите на комплекта ELISA?

2022-12-23

Комплектът ELISA се основава на твърда фаза на антиген или антитяло и ензимно маркиране на антиген или антитяло. Антигенът или антитялото, свързани с повърхността на твърдия носител, все още запазва своята имунологична активност, а ензимно белязаният антиген или антитяло запазва както своята имунологична активност, така и ензимната си активност. По време на определянето, тестваният образец (в който се измерва антитялото или антигена) реагира с антигена или антитялото на повърхността на твърдия носител. Комплексът антиген-антитяло, образуван върху твърдия носител, се отделя от другите вещества в течността чрез промиване.

Добавят се маркирани с ензими антигени или антитела, които също се свързват с твърдия носител чрез реакция. По това време количеството ензим в твърдата фаза е пропорционално на количеството вещество в пробата. След добавяне на субстрата на ензимната реакция, субстратът се катализира от ензима, за да се превърне в оцветени продукти. Количеството на продукта е пряко свързано с количеството на тестваното вещество в пробата, така че може да се извърши качествен или количествен анализ според дълбочината на цвета.

Високата каталитична ефективност на ензимите индиректно усилва резултатите от имунния отговор, което прави анализа много чувствителен. ELISA може да се използва за определяне на антигени, но може да се използва и за определяне на антитела.

Основни принципи на комплекта ELISA
Той използва специфична реакция на антиген и антитяло, за да свърже обекта с ензима и след това произвежда цветна реакция между ензима и субстрата за количествено определяне. Обектът на измерване може да бъде антитяло или антиген.

При този метод на определяне са необходими три реагента:
â Антиген или антитяло в твърда фаза (имунен адсорбент)
â¡ Ензимно белязан антиген или антитяло (маркер)
â¢ субстрат за ензимно действие (агент за развитие на цвета)

При измерването антигенът (антитялото) първо се свързва с твърдия носител, но все още запазва своята имунна активност и след това се добавя конюгат (маркер) на антитяло (антиген) и ензим, който все още запазва първоначалната си имунна активност и ензим дейност. Когато конюгатът реагира с антигена (антитялото) върху твърдия носител, се добавя съответният субстрат на ензима. Тоест каталитична хидролиза или REDOX реакция и цвят.

Сянката на цвета, която произвежда, е пропорционална на количеството антиген (антитяло), което трябва да се измери. Този оцветен продукт може да се наблюдава с невъоръжено око, оптичен микроскоп, електронен микроскоп, може също да се измери със спектрофотометър (уред за етикетиране на ензими). Методът е прост, удобен, бърз и специфичен.

Предишен:Представяне на Elisa Plate

Следващия:Защо клетъчната култура първо лизира червените кръвни клетки?