Основно въведение
Еритроцитният лизат е един от най-простите и лесни методи за отстраняване на червените кръвни клетки, тоест за разделяне на червените кръвни клетки с лизат, който не уврежда ядрените клетки и може напълно да премахне червените кръвни клетки. Разцепването на лизата е лек метод за отстраняване на червените кръвни клетки, който се използва главно за отделяне и пречистване на тъканни клетки, диспергирани чрез ензимно смилане, отделяне и пречистване на лимфоцити и отстраняване на червени кръвни клетки в експериментите с тъканни протеини и нуклеинови клетки. киселинна екстракция. Тъканните клетки, получени чрез лизат на червени кръвни клетки, не съдържат червени кръвни клетки и могат да бъдат допълнително използвани за първична култура, клетъчно сливане, поточна цитометрия, разделяне и екстракция на нуклеинова киселина и протеин и др.
Инструкции за употреба
Проба от тъканни клетки
1. Пресните тъкани се усвояват от панкреас/ензим или колагеназа и се диспергират в суспензия от единични клетки, а супернатантата се изхвърля чрез центрофугиране.
2. Вземете ELS лизат от хладилника при 4°C, добавете ELS лизат към клетъчната утайка в съотношение 1:3-5 (добавете 3-5 ml лизат към 1 ml пресована клетка), внимателно издухайте и разбъркайте.
3. Центрофугирайте при 800-1000rpm за 5-8 минути и изхвърлете горната червена бистра течност.
4. Утаената част се събира и центрофугира с разтвор на Ханк или безсерумен културен разтвор за 2-3 пъти.
5, ако крекингът не е завършен/завършен може да се повторят стъпки 2 и 3.
6. Клетки за повторно суспендиране за последващи експерименти; Ако се екстрахира РНК, най-добре е това да се направи в разтвора, приготвен от Стъпка 4, като се използва DEPC вода
Червените кръвни клетки имат много кратък жизнен цикъл, само 120 дни, но те възпроизвеждат кръв много бързо и в този случай те са особено способни на клетъчно делене и те са най-бързо делящите се клетки от всички, така че тази клетка е много ценна, така че е много полезно за клетъчна култура. Много е просто, в него няма никакви органели, а само клетъчни мембрани и протеини.